Profesi dokter gigi merupakan salah satu profesi yang rawan terjadinya kontaminasi infeksi, sehingga dibutuhkan proteksi universal precaution dengan mencuci tangan. Rendahnya pengetahuan berpengaruh pada perilaku cuci tangan yang buruk. Dokter gigi muda diharapkan memiliki pengetahuan baik dalam menerapkan prosedur cuci tangan sesuai prosedur yang ditetapkan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui hubungan pengetahuan dokter gigi muda dan penerapan prosedur cuci tangan di RSIGM Sultan Agung Semarang.
Jenis penelitian ini menggunakan analitik observational dengan pendekatan cross sectional. Teknik pengambilan sampel dengan simpel random sampling didapatkan 70 responden. Pengumpulan data dilakukan dengan memberikan kuesioner mengenai pengetahuan cuci tangan serta dilakukan observasi perilaku cuci tangan. Analisis statistik memakai uji korelasi Spearman rho.
Uji Spearman rho didapatkan nilai sig. 0.041 (P<0,05) dengan nilai koefisien korelasi sebesar 0,245. Disimpulkan bahwa terdapat hubungan yang bermakna antara pengetahuan dan penerapan prosedur cuci tangan pada dokter gigi muda di RSIGM Sultan Agung Semarang, dengan kekuatan hubungan lemah. Hasil observasi perilaku lima momen dan enam langkah cuci tangan dokter gigi muda menunjukan: 34,2% memiliki kategori sangat tidak baik.
Kesimpulan penelitian ini adalah pengetahuan berhubungan dengan penerapan prosedur cuci tangan pada dokter gigi muda di RSIGM Sultan Agung Semarang.

Kata kunci : Pengetahuan, Lima Momen Cuci Tangan, Enam Langkah Cuci Tangan