Latar Belakang : Luka iris diakibatkan oleh benda tajam. Perawatan luka yang baik bisa mempercepat penyembuhan luka. Pemberian antibiotik sering menimbulkan resistensi atau alergi. Berbeda dengan tanaman tradisional sedikit menimbulkan efek negatif. Penelitian sebelumnya, alfalfa punya efek antiinflamasi, mengandung senyawa aktif flavonoid, saponin, tanin. Tujuan : Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak alfalfa terhadap jumlah makrofag, fibroblas, dan kolagen pada luka iris tikus putih jantan Wistar. Metodologi : Penelitian ini adalah penelitian eksperimental dengan rancangan post test only control group design. Subyek penelitian berjumlah 50 ekor tikus jantan galur Wistar, dibagi secara acak menjadi 5 kelompok, yaitu K0 kontrol negatif (basis salep), K1 kontrol positif (gentamisin), dan P1,P2,P3 kelompok perlakuan ekstrak alfalfa secara berurutan 10%, 20%, dan 30%. Masing-masing kelompok terdiri dari 10 ekor. Penelitian dilakukan 2 kali terminasi untuk pengambilan jaringan kulit guna pemeriksaan histopatologi, yaitu hari ke-3 untuk mengetahui jumlah makrofag dan fibroblas dengan pewarnaan hematoksilin eosin dan hari ke-7 untuk jumlah kolagen dengan pewarnaan Sirius red. Data fibroblas diuji Anova dan dilanjutkan Post Hoc Tukey. Data makrofag dan kolagen diuji Kruskal Wallis dilanjutkan Mann-Whitney U. Hasil : Uji statistik menunjukkan bahwa jumlah makrofag (sig 0.011) dan ada perbedaan antara K0 dengan P1,P2,P3 dan K1 dengan P2. Hasil uji jumlah fibroblas (sig 0.010) dan ada perbedaan antara P3 dengan P1 dan K1. Adapun uji statistik jumlah kolagen menunjukkan bahwa (sig 0.00) dan ada perbedaan jumlah kolagen antara K0 dengan P1,P2,P3, dan K1 dengan P2,P3. Kesimpulan : Ekstrak alfalfa berpengaruh menurunkan jumlah makrofag dan fibroblas dan menaikkan jumlah kolagen, terutama pada ekstrak alfalfa dosis 20%.

Kata kunci : alfalfa, makrofag, fibroblas, kolagen