Infeksi terkait pelayanan kesehatan (Healthcare-Associated Infections) merupakan masalah kesehatan global, kebersihan tangan (hand hygiene) dengan antiseptik seperti chlorhexidine 4% salah satu strategi pencegahan utama pada HAIs. Efektivitas antiseptik ini dapat berkurang yang dipengaruhi oleh batas waktu penggunaan setelah kemasan dibuka, yang dikenal sebagai Beyond Use Date (BUD). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh Beyond Use Date Chlorhexidine 4% terhadap persentase jumlah koloni mikroorganisme pada tangan.
Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dengan rancangan Post Test Only Group Design. Variabel bebasnya adalah beyond use date chlorhexidine 4% yang diuji pada minggu ke-0, 2, 4, 6, dan 8. Variabel terikatnya adalah persentase penurunan jumlah koloni mikroorganisme pada tangan (CFU/cm²). Sampel penelitian berjumlah 25 tenaga medis di Rumah Sakit Islam Sultan Agung Semarang, yang dibagi menjadi lima kelompok perlakuan. Data dianalisis menggunakan uji One Way Anova untuk mengetahui perbedaan rerata persentase jumlah koloni mikroorganisme antar kelompok.
Rerata persentase jumlah koloni mikroorganisme pada minggu 0,2,4,6 dan 8 pada handwash menggunakan beyond use date chlorhexidine 4% masing-masing sebesar 90,17%; 89,58%; 88,78% dan 87,14%; 85,48%, dan dari hasil uji one way anova didapatkan hasil p-value sebesar 0,121 (p>0,05) yang menunjukkan tidak ada perbedaan rerata persentase jumlah koloni mikroorganisme antar kelompok.
Dengan tidak adanya perbedaan signifikan antar berbagai kelompok, hal ini menunjukkan bahwa beyond use date chlorhexidine 4% tidak berpengaruh terhadap persentase jumlah koloni mikroorganisme pada tangan.

Kata Kunci : Beyond use date (BUD); Chlorhexidine 4%; Jumlah Koloni Mikroorganisme