Metoda kultur mesechymal stem cell (MSC) dengan menggunakan mesenchymal stem cell hypoxia coditional medium (MSC-HCM) yang diperoleh dari modifikasi kultur MSC pada lingkungan hipoksia bertujuan untuk mempercepat self-renewaldan melihat persentase ekspresi CD73, CD90, dan CD105.
Desain penelitian yang digunakan, post test only control group, sampel penelitian adalah MSC panen ke-4 dibagi menjadi 4 kelompok. P1 ditumbuhkan pada medium mengandung 25% MSC-HCM, P2 ditumbuhkan pada medium mengandung 50% MSC-HCM, P3 ditumbuhkan pada medium mengandung 75% MSC-HCM, kontrol hanya diberikan DMEM. Tiap kelompok direplikasi sebanyak 3 kali. Pengamatan dilakukan setelah diinkubasi selama 72 jam, sel dipanen kemudian dihitung jumlahnya dengan menggunakan bilik hitung sedangkan ekspresi CD73, CD90, dan CD105 diukur menggunakan flowsitometri.
Uji parametrik ANOVA terhadap self-renewal pada kelompok perlakuan kontrol, P1, P2, dan P3 terdapat perbedaan yang bermakna (p<0,05), dilanjutkanPost-Hoc Testdengan hasil semua kelompok perlakuan menunjukanperbedaan yang bermakna (p<0,05).Sedangkan uji ANOVA ekspresi CD73, CD90, dan CD105 pada kelompok perlakuan kontrol, P1, P2, dan P3 menunjukanperbedaan yang bermakna (p<0.05),dilanjutkan Post-Hoc test hasilnya semua kelompok perlakuan memiliki perbedaan yang bermakna. Uji korelasi Pearson menunjukkan hubungan yang sangat kuat antara ekspresi CD73, CD90, CD105 (r>0,90).
MSC-HCM dapat digunakan kembali sebagai medium kultur yang sangat baik untuk MSC, dimana dapat meningkatkan jumlah self-renewal dan meningkatkan ekspresi CD73, CD90, dan CD105.

Kata kunci : Mesenchymal stem cell – hypoxia conditioned medium, mesenchymal stem cell, self-renewal, ekspresi CD73, CD90, CD105