Ulkus diabetikum merupakan salah satu komplikasi serius diabetes melitus yang disertai infeksi bakteri, salah satunya Enterococcus faecalis. Bakteri ini memiliki kemampuan bertahan hidup yang tinggi dan menunjukkan peningkatan resistensi terhadap antibiotik topikal seperti mupirosin, penggunaan mupirosin yang luas dilaporkan dapat menimbulkan efek samping. Tujuan penelitian ini untuk menganalisis perbedaan zona hambat cell-free supernatant Lactobacillus casei dibandingkan dengan salep mupirosin terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan post-test only control group design. Sampel berupa isolat klinis Enterococcus faecalis yang berasal dari ulkus diabetikum pasien. Terdapat tiga kelompok perlakuan, yaitu CFS Lactobacillus casei ATCC 393 sebagai kelompok perlakuan, salep mupirosin 2% sebagai kontrol positif, dan NaCl 0,9% sebagai kontrol negatif. Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan menggunakan metode difusi cakram pada media Mueller-Hinton agar. Parameter yang diukur adalah diameter zona hambat pertumbuhan E. faecalis. Analisis data dilakukan menggunakan uji Shapiro–Wilk yang dilanjutkan dengan uji nonparametrik Mann–Whitney.
Penelitian menunjukkan bahwa CFS Lactobacillus casei mampu membentuk zona hambat terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis dengan rata-rata diameter10,5  0,52., sedangkan mupirosin 2% menghasilkan zona hambat dengan rata-rata 22,67  0,55. Kelompok kontrol negatif tidak menunjukkan zona hambat. Uji Mann–Whitney menunjukkan perbedaan yang bermakna secara statistik antara kelompok CFS L. casei dan mupirosin 2% (p = 0,001).
Kesimpulan penelitian ini adalah terdapat aktivitas antibakteri pada CFS Lactobacillus casei terhadap pertumbuhan Enterococcus faecalis secara in vitro.

Kata Kunci: Cell-free supernatant, Lactobacillus casei, Enterococcus faecalis.