Latar belakang: Air Susu Ibu (ASI) eksklusif merupakan asupan terbaik bagi bayi usia 0–6 bulan karena mengandung gizi lengkap dan antibodi alami. Namun, masih terdapat ibu yang tidak memberikan ASI eksklusif, salah satunya dipengaruhi oleh tingkat pengetahuan. Tujuan penelitian ini adalah untuk menganalisis hubungan pengetahuan ibu dengan pemberian ASI eksklusif di wilayah kerja Puskesmas Tambakaji Kota Semarang. Metode: Penelitian ini menggunakan desain kuantitatif deskriptif korelasi dengan pendekatan cross sectional. Populasi penelitian adalah seluruh ibu yang memiliki bayi usia 0–6 bulan, dengan sampel sebanyak 47 responden yang dipilih menggunakan purposive sampling. Instrumen yang digunakan berupa kuesioner pengetahuan dan praktik ASI eksklusif. Data dianalisis secara univariat dan bivariat menggunakan uji Chi-Square. Hasil: Mayoritas responden memiliki pengetahuan baik (66,0%), sedangkan sisanya memiliki pengetahuan cukup (34,0%). Sebagian besar responden (76,6%) memberikan ASI eksklusif, sementara 23,4% tidak. Hasil uji Chi-Square menunjukkan adanya hubungan signifikan antara pengetahuan ibu dengan pemberian ASI eksklusif (p < 0,001). Kesimpulan: Semakin baik pengetahuan ibu, semakin tinggi kecenderungannya untuk memberikan ASI eksklusif. Peningkatan edukasi menyusui secara berkelanjutan sangat diperlukan untuk mempertahankan dan meningkatkan praktik ASI eksklusif.
Kata kunci: ASI Eksklusif, ibu menyusui, pengetahuan